不同浓度雌二醇及PGE2对人子宫内膜基质细胞增殖及PCNA表【巴黎澳门人娱乐网站】

本文摘要：宫腔黏附(intrauterineadhesions，IUA)是由于各种原因造成子宫内膜恩底部全部或部分病变、增厚，造成子宫前后壁黏附、宫腔枪机造成宫腔容积增大，引发患者月经转变和生育出现异常。近年来随着人流、药流手术及宫腔操作者的激增，宫腔黏附已沦为妇科常见病之一，并且沦为不育、流产、早产的一项最重要原因。宫腔黏附治愈率低落，手术分离出来后黏附易发，严重影响着广大女性的身体及心理健康。 因此宫腔黏附分离出来术后如何避免黏附发作、增进内膜生长的化疗是临床工作的众多难题。

宫腔黏附(intrauterineadhesions，IUA)是由于各种原因造成子宫内膜恩底部全部或部分病变、增厚，造成子宫前后壁黏附、宫腔枪机造成宫腔容积增大，引发患者月经转变和生育出现异常。近年来随着人流、药流手术及宫腔操作者的激增，宫腔黏附已沦为妇科常见病之一，并且沦为不育、流产、早产的一项最重要原因。宫腔黏附治愈率低落，手术分离出来后黏附易发，严重影响着广大女性的身体及心理健康。

因此宫腔黏附分离出来术后如何避免黏附发作、增进内膜生长的化疗是临床工作的众多难题。目前宫腔黏附分离出来术后多使用人工周期化疗2～3个月增进子宫内膜的再造，避免黏附发作。

但雌激素剂量及疗程目前尚不明确规定，主要是根据患者的黏附程度、类型以及术者的经验，且化疗效果并不过于失望，子宫内膜的发育并无法获得很好的提高。有些学者指出对雌激素生理剂量违宪的子宫内膜，可增大雌激素剂量增进子宫内膜的生长。但也有研究找到子宫内膜基底层相当严重损毁后，内膜再造能力上升，低雌激素水平有可能造成某些纤维化细胞因子水平的下降，反而增进宫腔黏附的构成。雌激素的有所不同用量以及应用于时间的长短对子宫内膜生长起到的影响尚能不具体。

　　　病毒感染对宫腔黏附的发作仍不存在争议，目前尚不研究证明病毒感染可必要诱导宫腔黏附的再次发生，但学者们对病毒感染可增进宫腔黏附的更进一步发展已基本达成协议共识。有学者找到有些宫腔黏附患者同时不存在输卵管周围黏附、子宫内膜亚急性或慢性炎症及细菌感染，解释炎症反应在宫腔黏附的再次发生中起着最重要起到。

病毒感染后的炎症反应有可能造成子宫内膜受损激化，引发子宫内膜修缮障碍，加快宫腔黏附的再行构成。在所有的致炎因子中，前列腺素E2(prostaglandinE2，PGE2)是一种最重要的细胞生长和调节因子，对多种细胞的细胞分裂及生物学功能有调节作用，并与子宫内膜生理及病理密切相关。它能诱导全身炎症反应，强化细胞中胶原生物的制备，增进炎性区域再次发生纤维化转变。

但它在能否增进宫腔炎症的再次发生从而激化宫腔黏附构成方面的研究尚少。目的　　　本课题通过子宫内膜基质细胞体外培育传代系统，应用于有所不同剂量、有所不同时间雌二醇及炎症介质前列腺素E2起到于细胞，使用MTT法及RealtimePCR法仔细观察雌二醇及炎症因子PGE2对子宫内膜基质细胞生长的情况，为更进一步探寻宫腔黏附分离出来术后辅助雌激素化疗的剂量、时间以及炎症对内膜快速增长若无影响、如何修缮病变子宫内膜的生长、提高宫腔环境、提升胎儿亲率获取部分实验依据。

方法　　　1.使用胶原酶消化法及筛网法分离出来培育人子宫内膜基质细胞，MTT法绘制细胞长时间生长曲线，仔细观察细胞生长周期。通过形态学及免疫组化法对培育的细胞展开检验。

2.将人子宫内膜基质细胞分成对照组：重新加入长时间培养液。雌二醇组：分别重新加入浓度为1x10-9、10-8、10-7、10-6mol/L雌二醇。雌二醇+PGE2两组：同时分别重新加入有所不同浓度的雌二醇和PGE2（浓度为50ng/L),PGE2组只重新加入PGE2（浓度为50ng/L)。

MTT法间接测量各组别子宫内膜基质细胞增殖情况，动态荧光定量PCR法测定各组细胞内PCNAmRNA传达的变化。　　3.将所有实验数据以均数±标准差(±S)回应，独立国家样本间使用t检验分析，各组间资料使用单因素方差分析法分析，使用LSD-t检验法展开两两较为，检验水准α=0.05。

　　结果1.细胞形态学特点及免疫组化结果：培育出有的基质细胞多为多角形，细胞两端有多个短小凸起，细胞排序无极性，贴壁生长。随着细胞的传代培养，细胞渐渐变长成梭形，具备成纤维细胞形态。

　　2.细胞生长周期一般为7-10天，第1天为潜入生长期，第2-4天转入对数生长期，5-6天后约平台期，7天后渐渐衰退消失。基质细胞特异的波形蛋白抗体(Vimentin)染色阳性，阳性细胞胞质呈圆形棕黄色，角蛋白抗体染色阴性。　　3.随着起到时间的缩短，雌二醇组基质细胞增殖亲率显著增高，细胞增殖呈圆形时间依赖性，差异有统计学意义（P0.05）。

24h雌二醇+PGE2组与E2两组较为，细胞平均值增殖率增高，差异有统计学意义（P。

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